放射免疫分析
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放射免疫分析（英文：Radioimmunoassay，RIA），又称为放射免疫分析法、放射免疫测定或放射免疫测定法，简称放免或放免法，是一种在无须采用生物测定方法的情况下用于检测抗原（例如，血清之中激素的水平）的实验室测定方法。这一方法是由罗莎琳·萨斯曼·耶洛和Solomon Aaron Berson于二十世纪50年代创建的[1]。1977年，耶洛因为建立胰岛素的RIA检测方法而获得诺贝尔医学奖：在内分泌学领域，当时认为对于此类微量激素的精确测定乃是一种突破。
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基本原理
RIA的基本原理为：放射性同位素标记的抗原（简称“标记抗原”）和非标记抗原（标准抗原或待测抗原）同时与数量有限的特异性抗体之间发生竞争性结合（抗原－抗体反应）。由于标记抗原与待测抗原的免疫活性完全相同，对特异性抗体具有同样的亲和力，当标记抗原和抗体为数量恒定时，待测抗原和标记抗原的总量大于抗体上的有效结合点时，标记抗原-抗体复合物的形成将随着待测抗原量的增加而减少，而非结合的或游离的标记抗原则随着待测抗原数量的增加而增加（也就是所谓的竞争结合反应），因此测定标记抗原-抗体或标记抗原即可推出待测抗原的数量。
抗原的放射性标记常常是利用碘发射γ射线的放射性同位素与酪氨酸结合来实现的。病人血清等标本之中所含的是未经放射性标记的抗原（亦可称为“冷”抗原），即待测抗原。总体上来说，特异性抗体之上抗原结合部位的数量是有限的。相对有限的抗原结合部位而言，标记抗原与待测抗原之间属于竞争关系。通过绘制结合曲线，即可计算出病人血清之中待测抗原的确切数量。
在采用这种方法的时候，结合抗原与非结合抗原之间的分离至关重要。最初，为了沉淀和离心抗原－抗体反应所形成的免疫复合物，分离方法采用的是针对第一抗体的第二抗体。后来，在对T3和T4进行RIA测定时，哥伦比亚大学的Werner和Acebedo对RIA方法进行了扩展，采用活性炭悬浊液进行沉淀[2]。1975年，Acebedo和Hayek等人在BBRC之上发表了人TSH的超微量RIA法[3]。
优缺点
RIA技术极其敏感而又极其特异，但其却需要具备尖端复杂的设备，且成本也不低。同时，RIA还需要特殊的预防措施，因为其要用到放射性物质。因此，如今RIA在很大程度上已经被ELISA所取代。就ELISA而言，抗原－抗体反应的测定采用的是颜色变化信号，而不是放射性信号。
参考文献
- ↑ Yalow RS, Berson SA. Immunoassay of endogenous plasma insulin in man. J Clin Invest 1960;39:1157-75. PMID 13846364.
- ↑ Werner SC, Acebedo G, Radichevich I. Rapid radioimmunoassay for both T4 and T3 in the same sample of human serum. J. Clin. Endocrinol. Metab.. 1974, 38 (3): 493–5. PMID 4815178.
- ↑ Acebedo G, Hayek A, Klegerman M, Crolla L, Bermes E, Brooks M. A rapid ultramicro radioimmunoassay for human thyrotropin. Biochem. Biophys. Res. Commun.. 1975, 65 (2): 449–56. doi:10.1016/S0006-291X(75)80168-9. PMID 1148002.
参见
外部链接
- MeSH（医学主题词）上面的Radioimmunoassay
- Radioimmunoassay- procedure
- http://www.lib.mcg.edu/edu/esimmuno/ch4/radassay.htm
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参考来源
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