临床生物化学/其它影响酶活性因素

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临床生物化学

血清酶定量的检测技术
- 酶活性测定条件的选择和限定
  - 底物、辅因子、活化剂、变构剂的种类和浓度
  - 指示酶与辅助酶的种类和浓度
  - 反应体系的最适pH、缓冲液的种类和浓度
  - 其它影响酶活性因素
  - 温度的控制

除了上述主要因素外，一些其它因素也会影响酶活性，如反应体系中含有氧化剂，可氧化酶蛋白中甲硫氨酸、色氨酸和酪氨酸残基，使酶失活，试剂盒中常用的一些表面活性剂如Tween-80、Brig-35等会抑制一些酶的活性。

其它因素中，对酶测定而言，最重要的是抑制剂的作用，抑制作用是酶学中的一个重要研究内容。但如只涉及到设计和选择测定酶的方法，则比较简单，既然要测定的是“最适条件”下的最大反应速度，那么不论是可逆或不可逆抑制剂，也不论是竞争性、非竞争性、反竞争性抑制剂都应在反应体系中设法除去。此问题在测定尿液中尤为突出。尿中排出大量代谢产物，不少物质会影响酶，如脲可使酶解聚、磷酸盐抑制磷酸酶活性。在病理情况下尤其使用各种药物后，使情况更为复杂，此时尿中可出现不少正常情况下不出现物质，即可能抑制酶活性，也可能激活酶活性。为使脲酶测定结果有一定可比性，最好在测定脲酶前，通过透析、凝胶层析或超滤将小分子化合物与酶分开，这样较为可靠。